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HPLC-ELSD法检测大豆卵磷脂方法的优化
来源:卵磷脂检测 | 作者:博恩德检测 | 发布时间: 2021-09-14 14:57:16 | 273 次浏览 | 分享到:

      磷脂是一种纯天然营养保健食品, 来源极为广泛, 主要存在于动、 植物的细胞之中, 是生物细胞膜的主要成分, 动物体中含量多的有心、 肝、脑、 肾、 骨髓和卵等; 植物体中以油料作物种子含量较为集中,大豆卵磷脂(Lecithin High Potency ),又称大豆蛋黄素,是精制大豆油过程中的副产品,是通过溶剂萃取然后离心分离后通过醇洗得到。

       纯天然的卵磷脂主要是从豆类及豆类制品中获取。市面上粒状的大豆卵磷脂是大豆油在脱胶过程中沉淀出来的磷脂质,再经加工、干燥之后的产品。大豆卵磷脂中含有卵磷脂、脑磷脂等,具延缓衰老、预防心脑血管疾病等作用。大豆卵磷脂可增强细胞信息传递能力,从而提高大脑活力,提升细胞膜自我修复能力来保护肝脏。

       卵磷脂的检测方法很多,目前采用比较多的有高效液相色谱法,紫外分光光度法,红外吸收光谱法、薄层层析法等。高效液相色谱法以其快速、灵敏,易于自动化等优点,常被科研工作者采用作为检测手段。由于卵磷脂的紫外吸收波长较低(205 nm),处于紫外吸收波长的末端,容易受其他溶剂的干扰。采用蒸发光散射检测器(ELSD),选用HPLC-ELSD检测超声波法和超临界法提取的大豆卵磷脂,对大豆卵磷脂含量的高效液相色谱法测定进行了改进,精密度试验和加样回收率试验证实该方法准确、可靠,可为深入研究大豆卵磷脂的含量以及大豆和豆制品的综合利用开发提供理论依据和技术指导。

       超声方法优点是快捷,萃取结果重复性好,误差小。但超声萃取杂质较多,卵磷脂纯度比超临界萃取法提取的卵磷脂纯度低。所以在选用高效液相色谱法检测超声波法提取的卵磷脂含量时一定要注意流动相比例的选择。试验中某一流动相比例的变化,是基于参考文献以及笔者试验经验所得,如果更深入进行流动相的分析,对试验研究则更有参考意义。

       经试验,确定检测超声波萃取卵磷脂流动相最佳配比为:V(异丙醇)/V(正己烷)/ V(水)= 54:28:10,卵磷脂与样品中其他组分完全分离,峰型良好;确定检测超临界萃取卵磷脂流动相最佳配比为:V(异丙醇)/V(正己烷)/ V(水)= 53:28:10,卵磷脂与样品中其他组分完全分离,峰型良好。

       色谱分离过程是吸附剂、溶质和流动相三者间相互作用的结果。液相色谱的选择性并不单纯地取决吸附剂的化学性质、颗粒大小和形状、及被分离的溶质,还和流动相的组成成份的各自性质和浓度存在密切的关系,它对色谱分离起着不可忽视的重要作用。本试验色谱分离属于液-固吸附层析,其中,吸附剂的性质由正相硅胶柱的性质决定;正己烷属无氢键型溶剂,极性较低,在它和溶质分子间只存在色散作用力(范德华力)和诱导作用力,根据高效液相层析法的基本概念和分离理论正己烷作为底剂,起决定基本色谱的分离作用;异丙醇由于具有黏性,极性较强,作为洗脱剂,起调节试样组份的滞留长短并对试样中某几个组份具选择性的作用。同一吸附剂性质下,溶剂对溶质分子的选择性是非常显著和重要的。


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